Tumevälja mikroskoopia: olulised oskused ja põhimõtete tundmine
Kõigepealt räägime tumeda välja mikroskoobi struktuurist ja omadustest, miks seda nimetatakse tumeda välja mikroskoobiks, milliseid katseid seda kasutada saavad ja kuidas seda hästi kasutada. Teil on sellest artiklist üksikasjalik arusaam.
Esimene on tumeda välja mikroskoobi struktuur. Meie igapäevaelus pole lihtne näha siseruumides lendavat tahkete osakeste tolmu, kuid pimedas ruumis, kui valguskiire tuleb ukse praost kaldu, võib näha tolmuosakesi, mis on optiline Dindari nähtus. Tumevälja mikroskoop on loodud selle põhimõtte põhjal. Selle struktuurne omadus on peamiselt keskse varjutusplaadi või tumeda välja kondensaatori kasutamine, mida tavaliselt kasutatakse paraboolse kondensaatorina, nii et valgusallika keskklaat blokeeritakse ja ei saa objektiivsele läätsele siseneda proovi alt üles. Nii et valgus muudab oma teed ja paistab vaadeldud proovile kaldu ning proov peegeldab või hajub valguse vastamisel ning hajutatud valgus pannakse objektiivi, nii et kogu nägemisväli on tume. Pimedas väljal täheldatakse kontrollitud objekti difraktseeritud valgust, mitte objekti ise, seega võib näha ainult objekti olemasolu ja liikumist ning objekti peent struktuuri ei saa eristada. Kui aga kontrollitud objekt on heterogeenne ja suurem kui 1/2 lainepikkus, sisenevad kõik difrakteeritud kiirte tasemed objektiivi samal ajal ja objekti struktuuri võib mingil määral jälgida. Ehkki üldine tumeda välja mikroskoop ei näe objekti peent struktuuri selgelt, suudab see eristada osakeste olemasolu ja liikumist kõrgemale 0. 0 04 UM, mis on iseloomulik, et tavalised mikroskoobid (maksimaalne eraldusvõime on 0,2 UM) ja mida saab kasutada elavate lahtrite struktuuri jälitamiseks.
Keskmise varjutusplaadi valmistamiseks saab tavalise mikroskoobi teisendada tumeda välja mikroskoobi, kui kondensaator on eemaldatav ja sulgu läbimõõt sobib tumeda välja kondensaatori paigaldamiseks. Kui tumeda välja kondensaatorit pole, võib paksust mustast paberist valmistada keskse varjutusplaadi ja panna filtriraamile tavalise mikroskoobi kondensaatori all ning ka tumeda välja efekti.
Reguleerige mikroskoobi kondensaator kõrgeimasse asendisse ja joondage fookuskaugus vähese energiatarbega peegliga.
Võtke okulaari maha, jälgige ja reguleerige membraani suurust läätse tünnist, et see oleks võrdne objektiivi tünnis nähtud objektiivi vaateväljaga.
Lõigake paksu musta paberiga keskkilp. Välisrõnga läbimõõt on sama kui filterraami oma ja keskosa suurus on sama, mis diafragma reguleeritud ava omal (väikese poolläbipaistva paberi tükk saab kondensaatori peeglipinnale panna valguse läbimise ja paberil kuvatava valguse kohta, mida saab diaphist).
Pange filtriraamile keskne valguskilp ja avage proov proovi jälgimiseks.
Kui on vaja jälgida tumedat välja suure võimsusega peegliga, tuleks keskse valguskilbi ümber uued valguspinnad pärast suure võimsusega peegliga keskendumist vastavalt vaateväljale.
Salvestage nende tehtud kesksed varjutusplaadid nii, et neid saaks hilisemates katsetes kasutada.
Rakendusmeetod. Paigaldage tumeda välja kondensaator mikroskoobi kondensaatori kronsteinile.
Valige tugev valgusallikas, kuid vältige otsese valguse sisenemist objektiivi, nii et kasutage valgustamiseks üldiselt mikroskoobilampi.
Kondensaatori ja isendi vahele tuleks lisada tilk lõhnavat asfalti, et vältida valgustusvalgust täielikult kondensaatoril ja tuvastatud objektile ei pääse nii, et tumeda välja valgustuse ei oleks võimalik saada.
Valguskoguja tõstmine, suunatud valguskoguja fookus tuvastatud objektile, see tähendab, et kiirgatakse tuvastatud objekti koonuse tala tipuga. Kui kondensaator saab liikuda horisontaalselt ja on varustatud keskmise reguleerimisseadmega, tuleks kõigepealt läbi viia keskmine reguleerimine nii, et kondensaatori optiline telg ja mikroskoobi optiline telg oleks rangelt sirgjooneline.
Valige kondensaatorile vastav objektiiv, reguleerige fookuskaugust (töömeetod on sama kui tavalise mikroskoobi oma) ja leidke vaadeldav objekti pilt.
Lõpuks jälgige õpetamisplatvormil Darkfieldi mikroskoobi all olevaid elavaid rakke. Pimedas taustal võib näha rakkude, tuumade ja organellide difraktseeritud valguseid.
